Huvudroller Dr. John Dorian Dr. Jonathan Michael Dorian, J.D., är en av huvudrollerna och berättaren i serien och spelas av Zach Braff.
J.D. är en yngre läkare som i seriens start börjar sin AT-tjänstgöring på Sacred Heart, där han lär känna Elliot som också precis börjat sin praktik. Han lär även känna sjuksköterskan Carla som har jobbat där i åtta år. J.D.:s bästa kompis är Chris Turk som han har känt sedan college. Man får en inblick i J.D.:s tankar då han ofta dagdrömmer märkliga drömmar. Under sitt första år börjar han dejta Elliot som han senare gör slut med. I andra säsongen försöker de igen men det fungerar inte. I tredje säsongen försöker de ännu en gång men J.D. krossar Elliots hjärta och de blir ovänner.
J.D. träffar andra personer mellan försöken med Elliot. I säsong 1 har han sex med Jordan Sullivan som var Dr. Cox exfru men det blir inget förhållande. Sedan hittar han Alex som han dejtar ett tag tills han får reda på att hon är missbrukare. I säsong två hittar han Jamie Moyer, (Amy Smart), vars man har legat i koma i 2 år. Hon vill träffa en ny person så de smådejtar lite och blir senare ihop på Jamies makes begravning. Men även detta förhållande tar slut. Han träffar även under säsong två Lisa i souvenirbutiken, men det blir aldrig något. I säsong 3 träffar han Danni Sullivan, (Tara Reid), som är syster med Jordan Sullivan och Ben Sullivan. De är ihop rätt länge men det tar slut när Danni får reda på att J.D. fortfarande gillar Elliot.
I säsong fyra kommer det en doktor som heter Molly Clock, (Heather Graham), som JD börjar gilla först när hon ska flytta till ett annat sjukhus. Det tar slut när Molly flyttar. Sen träffar J.D. den elaka advokaten Neena Broderick, (Julianna Margulies), ett tag men det tar slut för att hennes klient skulle stämma Turk och att han dejtade klientens advokat gjorde inte Turk och Carla så glada. Senare kom Kylie som J.D. träffade när han skulle göra en undersökning på hennes pojkvän James som hade en könssjukdom. James hade inte haft sex med Kylie utan varit otrogen med flera kvinnor så Kylie gjorde slut med honom och börjar träffa J.D. istället. De träffar varann ett tag tills Molly Clock kommer och hälsar på och J.D. går ut med henne på en dejt och råkar säga det till Kylie, som blir arg och ledsen och gör slut.
I säsong 5 träffar han Julie som det blir ett långt förhållande med, men tar slut för att hon aldrig har tänkt att skaffa barn. I slutet av säsong 5 träffar han Dr. Kim Briggs, (Elizabeth Banks), som blir gravid och de bestämmer sig för att behålla barnet. Men i början av säsong 6 byter Kim till ett annat sjukhus men J.D. och hon fortsätter med ett distansförhållande. När J.D. en gång hälsar på Kim för att göra ultraljud säger hon att hon har fått missfall och J.D. blir ledsen och de gör slut. Men när Turk och J.D. är på en läkarkonferens är Kim ordförande för mötet och har en jättestor mage. Hon vill att hon och J.D. ska träffas igen men J.D. vill inte. Kim föder barnet i början av säsong 7.
Man får även träffa några i JD:s familj. JD:s storebror Dan Dorian, (Tom Cavanagh), som fortfarande bor hos sin mamma kommer ofta och hälsar på J.D. Sam Dorian, (John Ritter), som är far till J.D. kommer en gång i säsong ett och hälsar på. I säsong fyra kommer Dan till J.D. och berättar att deras pappa har dött i en hjärtattack. Dan och J.D. tar detta besked på olika sätt. JD:s och Dans mamma får man aldrig se i serien men Dan berättar ständigt om de nya män som hon träffar.
Dr. Chris Turk Christopher Duncan Turk, Turk spelas av Donald Faison.
Turk är JD:s bästa kompis och har varit det sen college. Turk har ett förhållande med sjuksköterskan Carla Espinosa som han träffar i säsong 1, de förlovar sig i säsong 2, och i säsong 3 gifter de sig. De har problem med förhållandet i säsong 4, i säsong 5 försöker de skaffa barn och de får ett barn i säsong 6 som heter Izabella Turk.
Av Turks familj får se hans mamma och en av hans bröder, Kevin Turk. Turk började på Sacred Heart samtidigt som J.D. men han är kirurg så de träffas inte så mycket på jobbet.
Turk och JD har ett väldigt nära förhållande, det skämtas ofta i serien om att de är som ett gift gammalt par.
Dr. Elliot Reid Dr. Elliot Reid, Elliot är en av huvudrollerna i serien och spelas av Sarah Chalke.
Elliot är en kvinnlig läkare och börjar på Sacred Heart samtidigt som J.D. och Turk. Anledningen till att hon har ett mansnamn är att hennes pappa och syskon är läkare, så då fick hon ett manligt namn, eftersom det är fler män som är läkare. Elliot har (precis som J.D.), haft många förhållanden. Hon har varit ihop med J.D. tre gånger, en gång i säsong 1, en gång i säsong 2 och en gång i säsong 3. Men hon har även varit ihop med Sean Kelly (Scott Foley), i säsong 1, men det tog slut fort för Elliot tog jobbet före förhållandet.
I säsong 2 träffar hon Paul Flowers (Rick Schroder), men det tar slut för Elliot får kritik på jobbet för att Paul är sjuksköterska. Men i säsong 3 kommer Sean tillbaka och de börjar dejta igen och detta förhållande håller länge, även om Sean flyttar till Nya Zeeland i sex månader och de har ett långdistansförhållande. Men i slutet av säsong 3 tar det slut för JD lyckades övertala henne om att han var den rätta personen för henne. Men direkt när J.D. har fått Elliot inser han att han inte vill ha henne.
I säsong 4 börjar JD:s bror Dan Dorian (Tom Cavanagh) att dejta Elliot. Det tar snart slut för J.D. blir arg och ledsen för att Elliot blev ihop med hans bror. Men i slutet av säsong 4 kommer Jake som Elliot börjar gilla och de börjar dejta. Det tar slut i början av säsong 5 för Elliot kände att Jake inte var den rätte. Senare i säsong 5 när Elliot skulle skaffa sig en sexkompis hittar hon Keith Dudemeister, (Travis Schuldt), som hon börjar gilla på riktigt. Elliot och Keith håller ihop resten av säsong 5 och i säsong 6 friar Keith till Elliot och hon svarar ja. Men det visar sig att Elliot inte är redo för att gifta sig och gör slut och Keith blir ledsen och arg och kallar Elliot fula saker. De blir ihop ett litet tag igen, men Elliot gör slut igen.
Av Elliots familj får se hennes mamma och pappa. Pappan är chef på ett sjukhus som är bättre än Sacred Heart och gillar därför inte att Elliot jobbar där. Elliots pappa ger henne även ett hus och bil, men när Elliot gör sin pappa arg tar han tillbaka alla saker. Elliots mamma är en utseendefixerad kvinna som inte är trogen mot sin man. En gång när Elliot tar hem en dejt åker dejten och hennes mamma iväg på en romantisk semester. Man hör Elliot prata med sin mamma i telefon, hon frågar om hon har blivit lesbisk bara för att hon aldrig träffar någon. Elliots föräldrar har aldrig riktigt funnits där för henne för växte upp med en nanny. Man får även höra Elliot prata om sin bror Barry som är homosexuell men man har aldrig sett honom.
Carla Espinosa Carla Espinosa, Carla spelas av Judy Reyes.
Carla är sjuksköterska och har jobbat på Sacred Heart i 8 år innan J.D. och Turk kommer dit. Redan i början blir hon uppvaktad av Turk som vill gå ut på en dejt med henne. Detta leder till ett bröllop i säsong 3 och ett barn i säsong 6 som heter Izabella Turk. Carla är väldigt dominant och kan bli sur om hon inte får som hon vill. I början av säsong 1 är Carla och Elliot ovänner men senare är de bästa kompisar.
Av Carlas familj får se hennes mamma, hennes tre systrar och hennes bror. Carlas mamma dog i säsong 2 och Carla sörjer mycket. Hennes bror Marco och Turk är ovänner och bråkar mycket när han hälsar på. Carlas systrar får man se på hennes bröllop.
Under seriens gång visar det sig att Carla har dejtat Dr Cox, vilket Turk ogillar.
Dr. Perry Cox Dr. Percival Ulysses Cox, Dr. Cox spelas av John C. McGinley.
Dr. Cox är en läkare som har jobbat på Sacred Heart en längre tid innan J.D. kommer dit. Han hackar ständigt, (precis som The Janitor), på J.D. och kallar honom tjejnamn och Newbie. I säsong 5 blir han av en tidning utnämnd till stadens bästa doktor vilket gör honom kaxig. Han blir även vän med The Janitor i säsong 5, men det visar sig att vaktmästaren inte kan vara vän med Cox när de andra vaktmästarna ser.
Av Dr. Cox familj får man se hans exfru Jordan Sullivan som han senare blir ihop med igen och skaffar barn med. Hans religiösa syster Paige Cox hälsar på i säsong 5. Hans föräldrar har man aldrig fått se, men Cox berättar om hur hans pappa är alkoholist och visade kärlek endast genom att av misstag missa när han kastade tomma whiskyflaskor mot honom och hans syster. Man får se hans son Jack Cox som föds i säsong 2 och döps i säsong 5. I samma säsong blir Jordan gravid med ännu ett barn som hon föder i säsong 6. Det blir en dotter som Jordan vill döpa till Jennifer Dylan efter förslag av J.D. Perry gillade inte namnet då hennes initialer skulle bli "J.D.", men Jordan fick sin vilja igenom och deras andra barn döps till Jennifer Dylan Cox. J.D. vill bli Jennifers gudfar men det vägrar Dr. Cox och låter istället sonen Jack bli gudfar.
Dr. Cox dricker ofta i sin minibar som han har i sin lägenhet eller på baren dit J.D. och Turk ofta går.
Dr. Robert Kelso Dr. Robert Kelso, Bob spelas av Ken Jenkins.
Dr. Kelso är den elaka sjukhuschefen som både hatar och blir hatad av alla. Han är gammal i serien och går i pension i säsong 7. På sjukhuset spelar Bob mycket Pacman på ett arkadspel som står i sjukhusets fikarum. Han har slagit det högsta rekordet och det framgick att han stod där så länge att folk dog när han inte tog hand om dem. Bob står ofta på taket och röker pipa. Sjukhusets pengar går oftast åt till bekvämligheter i Bobs kontor.
Det framgår i serien att Bob är gift med en tjock kvinna i rullstol vid namn Enid. Bob har också en homosexuell son som heter Harrison och Bob klagar ofta på hans sons val av pojkvänner, antingen är de fattiga eller hemlösa. En av Harrisons pojkvänner ägde ett bageri där Bob fick ta hur mycket bakelser som han ville, vilket gjorde att han gick upp i vikt som Vaktmästaren hade väldigt roligt åt. Bobs hund Baxter var hans bästa vän och när Baxter dog blev han så ledsen att Carla fick ta hand om hans jobb i en dag. Baxter spelades av Ken Jenkins riktiga hund.
The Janitor (Glenn Matthews) The Janitor, (på svenska vaktmästaren), är en av huvudpersonerna i Scrubs och spelas av Neil Flynn.
Ända sedan JD började på Sacred Heart har Vaktmästaren retat och varit allmänt elak mot honom. Vaktmästaren ljuger även mycket, till exempel så har han sagt att han har ett barn och fru, men en annan gång är han inte i något förhållande. En annan gång sade han att han har varit professionell häcklöpare vilket kan vara sant för han springer väldigt snabbt och hoppar högt vilket man fick se när han skulle slå ner JD en gång. Han gillar i hemlighet "Den Blonda Doktorn" som är Elliot, men han vet inte hennes namn. Men i säsong 6 träffar han i två avsnitt en tjej som heter Lady. Man har aldrig fått höra vad Vaktmästaren heter på riktigt. Hans bästa kompis bland de andra vaktmästarna är den lilla Randall, men han är även bra kompis med Troy som jobbar i kafeterian. Neil Flynn som spelar Vaktmästaren är 1,96 m lång i verkligheten.
Neil Flynn sökte först rollen som Dr. Percival Ulysses "Perry" Cox, innan han fick sin roll som Vaktmästaren. Bill Lawrence, skaparen av serien, tyckte personligen att Neil var den bättre skådespelaren för rollen som Dr. Perry Cox. Men på grund av Bills personliga band till John C. McGinley fick inte Neil rollen.
Återkommande rollfigurer Ted Buckland Theodore Buckland, Ted, är Sacred Hearts advokat och spelas av Sam Lloyd.